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武汉源深免费提供支原体检测试剂盒试用装!

发布日期:
2012年4月19日 文章出处:来自

武汉源深免费提供支原体检测试剂盒试用装!

        武汉源深生物科技有限公司最新研发的支原体检测试剂盒为回馈客户,特向广大科研客户免费提供试用装,数量有限,欢迎来电来函垂询!

 

 

支原体检测试剂盒

                      ——高效、灵敏、便捷、质优、价廉

支原体检测试剂盒使用说明书

 

 

  1. 试剂:支原体检测试剂盒由武汉源深生物提供。
  2. 实验方法:

 

巢式PCR的方法检测支原体污染:

  1. 待检细胞汇合率在90%以上时取100 µL细胞上清液到离心管内
  2. 95oC孵育5分钟
  3. 短暂高速离心15秒钟左右
  4. 试剂盒里的组份:

引物混合物     (Primer Mix)                     20 µL

阳性对照DNA  (Positive Control DNA)             15 µL

阴性对照       (Internal Control DNA)             20 µL

巢式PCR一共需要做2轮PCR,本检测方法不受其他来源(如所培养细胞)DNA的影响,不但提高了检测的灵敏度,同时也提高了特异性。

 

  1. 第一轮PCR:

PCR 混合物:

向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分,

 

 

PCR组分(单位:µL)

阴性

对照管

阳性

对照管

细胞

检测管

3

3

3

1st PCR引物混合物

4

4

4

阳性对照DNA

3

阴性对照DNA

3

处理后样品

3

2X Taq master mix

10

10

10

总体积

20

20

20

盖紧管盖,轻弹管壁混匀,稍加离心。

 

  1. 热循环程序:

将准备好的PCR管放入PCR仪,运行如下程序。

 

 

94oC 9 min

1个循环

94oC 30 sec

30个循环

60oC 2 min

72oC 2 min

72oC 5 mins

1个循环

降温至4oC

 

 

支原体检测试剂盒

                      ——高效、灵敏、便捷、质优、价廉

 

  1. 第二轮PCR:

PCR 混合物:

向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分,

 

 

PCR组分(单位:µL)

阴性

对照管

阳性

对照管

细胞

检测管

3

3

3

2nd PCR引物混合物

4

4

4

阳性对照第一轮PCR 产物

3

阴性对照第一轮PCR 产物

3

处理后样品第一轮PCR 产物

3

2X Taq master mix

10

10

10

总体积

20

20

20

盖紧管盖,轻弹管壁混匀,稍加离心。

 

  1. 热循环程序:

将准备好的PCR管放入PCR仪,运行如下程序。

 

 

94oC 9 min

1个循环

94oC 30 sec

30个循环

60oC 2 min

72oC 2 min

72oC 5 mins

1个循环

降温至4oC

 

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